时候:2022-08-11 13:15:12
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微生物尝试室纯培育在生物手艺中是一个首要的操纵尝试,课题触及内容多、规模广,尝试难度很大。为了使先生更好地体会尝试中的良多使命,包罗仪器利用、菌液浓缩、菌株移植、接种等,都要在无菌的或不被污染的条件下遏制,才能保障做到纯洁培育胜利,笔者连系讲授现实谈谈对本课题的讲授设想。
一、讲授方针成立
根据课程内容请求,成立本课题讲授方针见表1。
表1
二、讲授实行设想
1.拟定尝试打算
根据课程内容请求,成立本课题讲授支配见表2。
表2
2.纯化大肠杆菌的道理
微生物的纯培育,选用平板划线法或浓缩涂布平板法,在牛肉膏卵白胨培育基上操纵,经培育后可分手获得单个细胞滋生而来的、有必然形状规划的仔细胞群体,即菌落。
3.筹办尝试资料
本课题所用资料、仪器及药品见表3。
表3
尝试资料 大肠杆菌 配制系列浓缩菌液
尝试仪器和装备 培育皿、试管、酒精灯、试管架、移液管、胶头滴管、接种环、涂布器、恒温箱、无脂棉、玻璃棒、消毒棉球、超净使命台 培育皿、试管、移液管、接种环、涂布器等灭菌(已灭菌备用)
尝试药品 牛肉膏、卵白胨培育基200ml、无菌水150ml 提早配制(灭菌备用)
4.尝试操纵
(1)指点尝试操纵。本课题尝试可根据上面尝试流程遏制操纵:
超净使命台倒平板、接种培育箱纯化培育。
(2)接种法。通俗是无菌培育基在水浴锅加热熔化后冷却至50℃摆布倒平板。操纵必须一向在酒精灯火焰旁遏制,每皿倒入15ml摆布并且不要将皿盖完整翻开,冷却后的平板要颠倒。
平板划线法(图1):即用接种环将菌体沾在平板培育基上。微生物细胞随画线次数的增添而削减,将微生物单个地分手,并终究构成标准的菌落。在画线操纵时应正视:一是用接种环取菌种之前、每次画线之前和画线竣事都要遏制灼烧灭菌,灼烧后要在酒精灯四周冷却后再操纵;二是画线时不要划破培育基,若是接纳分段画线法操纵从第二次操纵应总在上一次画线结尾起头,首尾区不能相连;三是操纵必须一向在酒精灯火焰旁遏制。
浓缩涂布平板法(图2):即先将菌液用无菌水遏制一系列梯度为(如10-1,10-2,10-3)浓缩液,用无菌玻璃涂棒将差别浓缩度的菌液平均地涂布在平板上。堆积在一路的微生物将被分手成单个细胞,从而能在培育基外表构成单个的菌落。在涂布操纵时应正视:一是配制系列梯度浓缩液必须用无菌水配制;二是配制系列梯度浓缩液和转移菌液和涂布历程等必须都在酒精灯火焰旁遏制。
(3)培育操纵。 将接种后的培育基和一个未接种的培育基(空缺)放入37℃恒温箱中,培育18~24h后,察看并记录。这时候代支配先生代表或尝试小组长遏制按期察看,并做好记录,以便实时让其余先生察看到自身的尝试功效。
2尝试讲授筹办使命几项准绳
2.1严酷遏制每一个尝试名方针预尝试
豫备尝试是保障尝试讲授品德的条件,其方针是:查验尝试手艺体例及操纵规程是不是切确无误,所用溶液、试剂和药品是不是及格;进一步肯定尝试所需时候,摸索能够或许或许或许呈现的题目并拟定措置题方针打算,根据尝试难易程度肯定评分标准等[6]。别的,制片及染色手艺尝试,出格是微生物的成长与培育尝试,常常呈现良多不测景象或不抱负的尝试功效。诸如,某种溶液和试剂失效,或某种微生物成长不好等等。是以,每一个尝试名目都该当提早预做一次,确保尝试功效切确、无误,以保障尝试讲授品德。
2.2当真做好尝试讲授后期筹办使命
尝试讲授的后期筹办使命,除严酷遏制预尝试外,尚需当真查抄显微镜和仪器装备、玻璃器皿及溶液、试剂等,和尝试桌凳的无缺状况。2.2.1显微镜的查抄要点尝试课前当真查抄:通俗光学显微镜机器局部的镜臂、物镜转换器、载物台、标本夹、粗细调理器,和光学体系的目镜、物镜和聚光镜的无缺环境,出格是要仔细查抄调理器的活络度和油镜的清楚度。2.2.2尝试用仪器装备完整性的查抄尝试课前该当当真查抄仪器装备的完整性。在尝试讲授历程中最隐讳呈现缺东少西,和仪器装备和物品品德分歧请求的景象[7]。每堂尝试课所需的统统物品,都该当备足贫乏,所用仪器装备都要对峙运转杰出。尝试用仪器及物品完整性查抄使命是相称啰嗦的,使命量也很大。举例申明,微生物学尝试课的前3个尝试名目,即光学显微镜的利用与革兰氏染色法、细菌勾当性及其荚膜察看、酵母菌的生死辨别,和放线菌、霉菌制片与细菌计数,所用的滴瓶合计200多个,须要一一地遏制严酷查抄:胶头是不是漏气,瓶中的试剂是不是失效、够用,滴芯是不是能顺遂地掏出(发明积淀和结晶应实时洗濯),标签变色严峻的还要实时改换。其余仪器装备及尝试桌凳的无缺状况也都该当遏制当真查抄,如一一查抄每一个尝试凳脚是不是松动,并实时拧紧等。2.2.3玻璃器皿必然要洗刷干净微生物尝试讲授所用的玻璃器皿数目很大,如试管、培育皿和三角烧瓶及载玻片等数以千计。用来艳服微生物培育基的大批试管、培育皿和三角烧瓶,有一丁点不干净就会成长霉菌;有的如载玻片上黏附了香柏油,洗刷难度很大。以是,玻璃器皿的洗刷使命是很是首要而艰难的。玻璃器皿的全数洗刷使命都是教员与同窗们共同完成的。洗刷后的查抄使命接纳对着阳光以流水冲刷的体例遏制,确保每一个玻璃器皿干净敞亮。其详细支配法式以下:玻璃器皿经先生洗刷后,再由同窗遏制查抄,最初由教员抽样查抄。如许,不只保障了玻璃器皿的干净度,还培育了先生把握高精度洗濯器皿的根基手艺及松散的迷信风格。
3正视并完美措置尝试讲堂上呈现的题目
对在微生物尝试讲授历程中常常呈现的一些题目,必须当真阐发缘由,并实时想体例措置。在呈现的题目中,有些是属于尝试内容及其手艺体例题目,但常常碰着的是一些因为先生贫乏应有的本质或经历所构成的,都该当实时阐发并恰当措置之。诸如,有的显微镜粗锣旋裂缝里有良多油渍,究其缘由是因为同窗们的手不够干净所构成的;为此,便请求先生在利用显微镜之前,必然要洗手。再如,个体同窗偶然将尝试用的标本片丢落在载物台上,为了防止近似环境再次产生,便请求先生每次尝试竣事后必然要盘点一下标本片的数目。第三,当发明个体先生把台微尺扔到放有载玻片的锅里,为此便不再将其摆放到先生的坐位上,而是现场把台微尺发放给每组同窗,并批注其价钱高贵,该当仔细利用,轻拿轻放,课后由课代表同一交给教员查对。第四,有的先生把双层瓶(重层瓶)的玻璃帽和装有结晶紫的滴蕊拧碎,为了防止近似环境再次呈现,每次上课前都要把其一一擦拭,并查抄每一个滴瓶的滴蕊是不是松动。
中图分类号:G647 文献标记码:A 文章编号:1674-9324(2016)38-0277-02
跟着我国高校教导科研奇迹的成长,为了顺应新世纪扶植立异型国度的须要,高校成立了以团队为主的科技立异情势,成立了多个自力于本科讲授尝试的科研尝试室。微生物学是生物迷信的首要分支,微生物规划简略、操纵轻易成为高新生物手艺的现实和手艺基石。良多微生物如大肠杆菌、酵母菌等作为研讨的情势生物和份子生物学首要的载体宿主,已成为各个尝试室惯例培育的微生物,是以良多高校都成立了微生物科研团队和科研尝试室。大批的教员,科研职员、研讨生和到场大先生立异立项的本科成耐久在一个尝试室外面遏制迷信研讨使命。可是,科研尝试室中存在良多风险人身宁静和尝试室宁静的隐患,这不得不激发咱们的高度正视。
讲授尝试室因为尝试自身宁静性高,尝试流程牢固,宁静防护方式完美等缘由,是以产生宁静变乱低,讲授尝试室产生变乱构成先生伤亡的事务鲜有报道。与本科讲授尝试室差别,科研尝试室常常具备上面几个特色:空间无限,尝试室仪器和试剂品种大都目大,职员多且绝对牢固,职员在尝试室勾当时候长。科研尝试室的方针是为了科技立异,是以常常尝试品种多,尝试新奇,尝试自身的风险系数高。因为良多新尝试的步骤和体例来自于文献,文献中贫乏响应的宁静防护方式的描写,构成了尝试操纵职员对尝试宁静自身风险性估量贫乏。别的一方面因为耐久待在绝对牢固的一个空间,对四周环境熟习,构成宁静认识慢慢削弱;耐久以来尝试室正视先生对尝试手艺的把握,轻忽对尝试室宁静的教导题目,也是构成宁静隐患的首要缘由。
最近几年来多起高校尝试室宁静变乱大多都是来自科研尝试室:2009年德国女迷信家在尝试历程中被含有埃博拉病毒的打针器刺到,疑似沾染埃博拉病毒;2013年04月30日南京理工大学尝试室爆炸构成1死3伤;2015年4月5日中国矿业大学尝试室产生爆燃,构成成1死4伤;2015年12月18日清华大学尝试室产生爆炸,构成1名博士后灭亡。这些变乱大多都是科研尝试室办理不标准构成的,是以微生物科研尝试室宁静题方针摸索与研讨很是首要。
一、微生物科研尝试室近况
微生物科研尝试室不只是科技立异平台,仍是本科生毕业设想、大先生立异立项的场合。研讨生平常糊口的大局部时候都在尝试室中:做尝试、看文献、歇息、组会会商等。跟着开放课题、大先生立异立项使大批本科生进入尝试室,构成大批职员在无限空间内勾当,这些给尝试室宁静办理带来庞大的挑衅。职员庞杂,人数浩繁是微生物尝试室宁静题目办理的重点。
迷信研讨是科研尝试室的首要使命,尝试室常常重点存眷底子常识和尝试手艺的把握,而轻忽了尝试室宁静教导。大大都科研尝试室并不对新进入尝试室的先生遏制过体系、周全的宁静教导培训。先生对尝试室存在的宁静隐患贫乏体会,对尝试中能够或许或许或许会产生的变乱贫乏应答的方式,极易将尝试中的小变乱演化成大灾害。
二、微生物科研尝试室存在的宁静隐患及其应答方式
1.尝试室水、火、电等的宁静。
宁静隐患:尝试室水、火、电等的宁静是尝试室宁静的重点,也是轻易轻忽和变乱常发的关头。在微生物学尝试室常常常利用到高压灭菌锅、酒精灯、电烘箱等仪器,尝试室中另有大批易燃易爆的无机溶剂及各种紧缩气体,若是装备和试剂摆放不妥或利用分歧理,极易构成风险变乱。尝试室中电器装备较多,有些装备如透风橱、摇床、培育箱、烘箱等摆放麋集并且终年处于运转状况,尝试室常常呈现插排数目大,摆放乱的环境,耐久利用轻易构成线路老化,产生泄电景象或自燃构成火警。
应答方式:节俭用水,常常查抄高低水是不是无缺;须要利用明火或易燃易爆品的尝试要在特地的房间遏制尝试,易燃易爆品须要零丁寄存,正视透风和温度;牢固仪器的位置,请专业手艺职员将触及的电路遏制公道设想和布排,大功率装备利用专线,削减插排的利用。装配防泄电装配,须要对装备和电路遏制按期查抄和掩护。
2.尝试试剂和药品的宁静。
宁静隐患:高校微生物学尝试室的强酸、强碱、无机溶剂、核酸染料等有毒无害药品,这些药品大多都无色有趣,且具备极高的毒性和社会风险性,若是未根据划定利用,不只会给操纵者带来极大的风险,还会构成尝试室环境的污染,严峻要挟尝试室师生宁静。强酸强碱等侵蚀性药品,能够或许或许或许会侵蚀操纵者的衣服和皮肤;有些试剂易挥发,经由历程呼吸体系吸入后会对人体安康构成风险;核酸染料等致畸致渐变类药品,这类药品无色有趣、剂量小,不易发觉但风险大,应设置特地操纵地区,制止在非操纵地区内遏制相干尝试;无菌操纵中常常利用到无水乙醇遏制消毒灭菌,极易激发熄灭,构成烧伤。
应答方式:标准尝试室试剂的寄存,将药品和试剂集合寄存,并对其遏制编号统计,便于查找和保管。对有毒试剂实行专人保管,严酷利用挂号利用轨制。有条件的尝试室该当将药品集合寄存在零丁的房间内;尝试操纵历程戴手套戴口罩,对挥发性尝试须要在透风厨中遏制;尝试中产生的烧毁物需分类后遏制搜集分手措置,不能随便乱扔乱倒。
3.生物宁静。
宁静隐患:微生物学尝试室研讨的东西是微生物,肉眼不可见可是对人身材安康有很大的影响,有些微生物是条件致病菌,在免疫力低、有开放性伤口的环境下轻易沾染从而加重病情;带有抗性标记的生物资料或其余无害资料若是不经措置就抛弃会对环境构成严峻风险。
应答方式:尝试室需指定特地职员尝试室菌株办理和收藏使命,严酷菌种利用挂号轨制。菌株是微生物尝试室最可贵的资本,该当标准菌株收藏体例,使每一个先生都能把握微生物的菌株收藏体例,并且养成菌株收藏的习气。按期地对菌株遏制收藏,并在每一个同窗毕业时做好菌株的交代使命。对尝试历程中利用过的任何生物资料在抛弃之前须要遏制灭菌措置。
4.大型仪器利用宁静。
宁静隐患:跟着尝试室的成长,科研尝试室引进了良多份子生物学、卵白抒发纯化、高压液相色谱等前进前辈尝试仪器,这些大型仪器是尝试室可贵的资本和资产,也是迷信研讨的首要东西,仪器装备的办理程度间接反映尝试室的使命效力。这些大型仪器若是操纵不妥,不只能够或许或许或许风险操纵职员的人身宁静,也会构成仪器的破坏,影响尝试的通俗遏制和尝试功效的靠得住性。尝试室大型仪器的宁静包罗两个条理:职员的宁静和仪器的宁静。气相色谱仪、液相色谱仪等大型仪器,在利用历程中会利用大批挥发性无机溶剂。高速离心计心情、电转仪等仪器,若是不根据操纵流程操纵能够或许或许或许会对尝试职员的身材构成毁伤。
应答方式:大型仪器的办理应实行专人担任制,每小我担任三到四台仪器。在利用前须要颠末特地的培训,经由历程培训测验及格前方能上机利用。在利用历程中按期对仪器遏制洗濯颐养和掩护,以保障尝试的顺遂遏制。
三、拟定宁静轨制,增强宁静办理
1.糊口区与尝试辨别开:将先生在尝试室的糊口用品跟尝试用品分隔,严禁在尝试室喝水、吃东西。先生做尝试必须穿尝试服,并严禁将尝试用品带入糊口区。
2.尝试区根据功效遏制分区:灭菌区、无菌操纵区、卵白操纵区和电泳区等。对每局部能够或许或许或许触及的有毒无害物品或存在的宁静隐患遏制标注,贴在该地区夺方针位置,并在提醒标语旁设置手套、口罩、护目镜等防护用品。
3.成立宁静值班轨制:天天支配职员值班,值班职员最初一个分隔,担任查抄尝试室的水、电、火及门窗的宁静,查抄仪器是不是封闭,是不是处于通俗运转状况,并做好。
4.增强教导:连系产生的案例,按期对先生遏制尝试室宁静教导;在能够或许或许或许存在风险的地区标记风险警示;在尝试室夺目位置吊挂尝试室宁静办理条例;对能够或许或许或许呈现的罕见风险环境遏制练习练习,增强对灭兵器利用,晋升应答突发状况的才能;学会割伤、烫伤的抢救体例,在尝试室设立特地的抢救箱。
四、小结
尝试室宁静是微生物科研尝试室遏制研讨的保障,也是耐久以来轻易被轻忽的题目。跟着尝试室职员和承当的科研名目愈来愈多,尝试室仪器的品种和数目大批增添,使尝试室的宁静和办理题目日趋凸起。宁静有序的尝试环境是尝试顺遂遏制的保障。微生物科研尝试室该当服膺一向把宁静题目放在第一位,根据相干的生物宁静标准和标准,成立并完美尝试室宁静办理轨制和标准微生物宁静操纵,增强对先生的宁静教导,并连系本尝试室自身的环境实时对尝试室遏制标准和调剂,防止尝试室宁静变乱的产生。
参考文献:
[1]温洪宇.通俗微生物学尝试室宁静办理及利用[J].尝试室研讨与摸索,2010,29(9):100-101.
[2]杨怡姝.大先生物学尝试室的生物宁静题目切磋[J].尝试手艺与办理,2011,28(5):188-190.
[3]王岩.浅谈高校尝试室生物宁静办理[J].尝试室研讨与摸索,2014,33(9):301-304.
中图分类号:R197.3 文献标识码:A 文章编号:1672-5336(2013)16-0064-02
当今社会,在社会热点中,微生物及其产生的各种毒素激发的污染备受存眷。是以,做好微生物尝试室的品德节制对监控食物宁静相当首要。本文就微生物尝试的品德节制遏制切磋。
1 专业职员的本质
专业手艺职员在微生物查验历程中该当具备较丰硕的专业常识和较强的阐发判定才能。同时要有杰出的职业品德,有松散的使命态度和高度的责任心;查验功效该当切确、靠得住,是以增强查验职员品德办理教导和手艺营业的培训显得及其须要。可按期构造专业手艺职员遏制培训和进修进修,促使查验职员对新现实、新手艺、新体例实时把握,培训使命应作为耐久的、长效的专业手艺职员前进本质的首要使命内容。将按期查核归入尝试室外部办理体系,作为查验员查验才能及标准谙练程度的一个验收法式。
2 仪器装备的节制
微生物尝试室首要查验用装备有:生物宁静柜、冰箱、培育箱、高压灭菌器、污染台、显微镜、蒸馏装备等。仪器装备应严酷根据出厂供给的有关划定和体例切确利用,同时正视仪器装备的品德节制,拟定相干品德办理文件,严酷对比此中仪器装备办理法式的划定履行。
2.1 仪器的推销
采办仪器历程中,须对其手艺方针、机能遏制遏制考查体会,并颠末有用论证前方能推销。推销珍贵、大型装备仪器时,供货方应答仪器遏制装配、调试、批准。确认统统手艺条件适合划定记尝试收报功效后,便可托付利用,利用历程中须明白保管人。
2.2 仪器装备的建档备案
对仪器装备遏制建档备案,成立仪器装备卡(应表明装备称号、编号、型号、出产厂称号、产地和价款、推销时候、启用时候、出厂编号等),归整利用申明书、 检定/校准证书、及格证和利用掩护记录等至同一档案盒内办理保管。
2.3 仪器装备的检定和校准
按期对强迫性检定的仪器和装备遏制校准,检定的计量局部须具备响应的资历,仪器检定及格前方可利用。仪器被挪动过、维修过或利用一段时候后,检测功效会构成必然影响,这时候要对仪器遏制时期查对。按期按仪器自校规程对不属于强检的仪器遏制自校,据仪器环境贴"及格”“准用”或“停用”标签。
3 试剂、标准物资、质控物的品德节制
3.1 培育基的质控
(1)培育基的采办与保管。采办培育基时正视挑选品德和诺言好的公司,要采办品德靠得住、未过时、品德杰出的培育基。
微生物尝试室收到培育基后,尝试室应有培育基的收货记录,记录详单应包罗出产商家培育基的称号、领受日期、批号、有用期、包装及其完整性。培育基在利用前,应有专人对培育基颠末考证及格,差别批次的培育基应做尝试对比。培育基通俗应储存于阴凉死板处,防止强光直射。有出格申明的培育基须严酷根据厂商供给的请求遏制储存和利用。
(2)培育基的利用。严酷根据尝试操纵手册划定对培育基遏制配制操纵。记录配制量与操纵者、日期,并于包装上表明利用刻日,按期做品德查抄,以保障其有用性。查验职员应谙练把握高压蒸汽灭菌手艺,根据响应的压力和温度请求对尝试用东西(培育皿、三角瓶、移液管等)及培育基等遏制灭菌措置。含糖类培育基的灭菌应正视节制在许可温度规模内,以防止养分成份的损失。培育基配制用水首要为蒸馏水、离子水或经措置后无搅扰剂和按捺剂的水。设置装备摆设用水的电阻率应300000Ω/cm(25℃的环境下)以上,重金属含量0.05mg/L以下。培育基消融后,应正视调理培育基的pH值适合响应请求[2]。按期查抄培育基的色彩和通明度,一旦发明很是,则舍弃不用。每批培育基均应做无菌尝试和已知菌株对比尝试,确保培育基的配制切确、消毒到达请求和操纵历程未受污染。如因质料保管不善而蜕变或过时的试剂应弃去。
3.2 试剂及血清成品的品德节制
(1)尝试历程中,根据请求选用差别品级试剂。试剂须根据相干请求按期改换,局部试剂请求现用现配。配好各种试剂后,填写标签均申明试剂称号、配制日期、有用期、配制者及设置装备摆设日期,并作好相干记录。为确保试剂的切确靠得住性,按期应做试剂机能测试,详细间隔时候视试剂的不变性和利用频次而定。如氧化酶试剂须每次利用前测试,靛基质试剂绝对不变可每周遏制1次测试。每次配制好的染色液该当遏制检测,常常利用染色液(如革兰染液)每周检测1次,不常常利用染色液在每次利用前[1]。为确保试剂不变性,选用恰当的储存体例对试剂储存。如:氧化酶试剂通俗置于棕色瓶于4℃冰箱保管。
(2)酶、抗血清等生物成品具备生物活性,该当正视其有用期,过时则舍弃不用。按申明请求遏制诊断血清的利用和保管,通俗请求置于4℃冰箱储存。在操纵历程中要尽快取用,裸露室温太久则易构成其失效。操纵前,出格要正视这些生物成品的有用期和效价。通俗第一次利用时,须用响应的标准菌株查抄抗血清的有用性,惯例使命中每一个月对其遏制检测1次。如呈现任何色彩的转变或浑浊,即不能利用。
4 尝试室环境节制
尝试室的环境影响检测功效的切确性。是以尝试室该当在室内光芒,氛围畅通,举措方式规划等方面应适合请求,不能对检测功效的靠得住性、有用性和切确性构成搅扰,同时还要起到对使命职员的自身宁静和仪器必然的掩护感化。微生物查验应在干净区(包罗超净使命台或干净尝试室)遏制,干净区应有较着标示。无菌室干净程度要到达标准请求,每次利用前须要紫外线灯消毒45min以上,根据标准划定的查验体例,按期对紫外线氛围消毒功效遏制测定。微生物尝试室的氛围品德、温湿度要天天遏制监测,并做好记录,以确保检测功效的靠得住性、有用性和切确性。
参考文献
[1]张红梅.卫生微生物查验的品德办理[J].适用防备医学,2007,4(2):584.
[2]陈天寿.微生物培育基的建造与利用.北京:中国农业出书社,1995.8~1431.
【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801(2012)12-0143-01
在微生物查验的历程中,若何防止尝试历程中的可变身分对检测功效的影响,评估检测功效的切确性、比拟功效和详细设定的方针之间的差别,保障功效的实在、靠得住和可反复性,是品德节制的首要方针。
尝试室品德节制包罗三局部内容,即室内品德节制、品德保障、室间品德节制。
1微生物尝试室室内品德节制
是根据本尝试室现实环境设想的品德节制体系,仅用于对本尝试室的使命遏制品德监测和评估。包罗对尝试职员、尝试步骤、仪器、装备、培育基、试剂、环境举措方式的监控。室内品德节制是查验功效切确靠得住的核心和根据。
尝试职员及培训:
1.1尝试职员。因为微生物学查验是一种庞杂的尝试,措置微生物学查验的手艺职员,必须颠末严酷的底子练习和教导,包罗微生物学、底子医学等常识的进修和专业化的尝试手艺培训,并经由历程专业手艺查核,及格后才能持证上岗[1]。除此之外,出格须要培育的是查验职员高度的责任心和松散务实的迷信态度。
1.2专业指点资料。此刻是信息和科技飞速成长的时期,手艺更新很是快,要想把握查验手艺成长的脉搏,跟上常识成长的步调,除把握功课指点书的内容,还必须大批浏览专业参考书,实时罗致新常识,更新体例。
1.3质控物的请求。
1.3.1标准菌(毒)株的来历。标准菌(毒)株必须来自权势巨子机构或承认局部[2],如我国的卫生部药品生物成品判定所菌种收藏中间、美国菌种收藏中间(ATCC)、英国国度菌种收藏中间(NCTC)等。
1.3.2标准菌(毒)株的挑选。应根据每项尝试的性子的差别和对标准菌株的生物学性状的请求,挑选作为品德节制的标准菌株。不管是定性尝试仍是定量尝试,品德节制体系要有充沛的活络度检测出尝试中呈现的偏差,是以品德的监测点必须设在一个敏感的位置。这个敏感点,对定性尝试,应在较弱阳性的规模内;对定量尝试,则应位于诠释尝试功效的决议性程度四周。
1.3.3标准菌(毒)株的办理。每一个微生物尝试室应成立健全严酷的标准菌(毒)株的办理轨制[3],包罗标准菌(毒)株的保管轨制、请领轨制、利用轨制、烧毁轨制等,并在文件中明白职责,谨防标准(毒)菌株外泄。
1.4品德节制标准。
1.4.1培育基的品德节制标准。凡是以细菌能否在培育基中成长杰出或能否构成典范菌落来权衡。底子培育基请求细菌不只能够或许或许或许成长,还必须发育杰出并能使细菌充实表现出其典范的特色。挑选培育基在准绳上应利用预期最难成长的细菌菌种,并且应少许接种(如0.5McFarlang1∶10浓缩接种0.001ml)。请求被按捺的菌种不成长或成长较弱,被挑选成长的菌种成长杰出。生化培育基,用作品德节制的菌种应包罗该生化反映为阳性反映和阳性反映的细菌。
1.4.2试剂和染色液的品德节制标准。试剂和染色液必须申明配制或购入的日期;按试剂请求的储存条件储存并在有用期内利用;对不变性较差的试剂,必须在尝试的同时遏制阳性和阳性对比尝试。
1.4.3抗血清的品德节制标准。抗血清的来历必须靠得住,并按建造商的利用申明利用与保管。在每次利用前应察看是不是廓清通明,任何浑浊与色彩转变,应视为杂菌污染,不应利用。
1.5仪器监控。
1.5.1高压灭菌器和干热灭菌器。新采办的灭菌器必须遏制灭菌机能检测,此后按期(每一个月1次)检测。大容量灭菌器还应在差别部位支配化学唆使卡以周全评估灭菌机能。灭菌功效监控利用生物唆使剂嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC7953、12980的培育液或菌片(含菌量为5×10 6/片)。
1.5.2培育箱、冰箱、水浴箱。在逐日使命起头和竣事时记录温度,按期检定和校订温度计,水浴箱须要按期加水,冰箱需按期除霜。
1.5.3二氧化碳培育箱。须天天查抄箱内的CO2含量,可用淋病奈瑟氏菌或脑膜炎奈瑟氏菌等CO2依靠细菌遏制成长尝试。
1.5.4厌氧罐或厌氧箱。在罐中或厌氧箱内用美蓝或刃天青作为唆使剂,无氧时均无色。罐中的催化剂钯颗粒须常常置160℃1.5h从头活化。
1.5.5生物宁静柜。若需改换滤网,则须由特地手艺职员遏制,对紫外线必须每3个月查抄1次消毒机能。
1.6环境举措方式的监控。环境举措方式(无菌间、超净使命台或层流干净室)对卫生微生物查验的品德影响较大,应按期监测其无菌功效,以保障其适合样品检测所需的环境请求。
2微生物尝试室品德节制的保障
品德保障是尝试室报告的品德获得保障的全历程,是指为到达既定的品德水准所接纳的统统须要方式。在品德节制名目中设想的步骤不能只限于尝试室的手艺操纵步骤,搜集适合的样本,接纳切确的保管体例,在划按时候内送往尝试室等都将影响检测的品德。
3微生物尝试室室间品德节制
是由尝试室之外的构造或机构对其已到达的品德水准遏制的评估。经由历程室间品德评估能够或许或许考查尝试室查验功效的切确性,并查抄和评估差别尝试室操纵的差别。
3.1盲点尝试。查核构造者可不按期将标准菌株及摹拟标本夹杂,送到受试尝试室,遏制未知样本的品德节制,能够或许或许比拟切确地反映受控尝试室的现实程度和才能。
3.2尝试室室间品德查核的感化。是对尝试室检测程度的中和判定,发明尝试室内质控难以发明的偏差和体系偏差,有益于偏差的改正和消弭,既前进了查验职员的操纵程度,也增强了查验职员阐发和措置题方针才能,是尝试室品德保障的首要东西。
4会商
疾病防备节制中间微生物尝试室应到场室内周全品德节制,并根据自身的特色设置质控物,对尝试历程中影响检测品德的关头关头遏制节制和监视,以发明偏差并实时改良,确保检测功效的切确性。别的,尝试室还应按期到场尝试室间的查核和才能考证勾当,并体会本尝试室在本地区或天下尝试室中的手艺位置,有益于尝试室手艺程度的前进。是以一个惯例尝试室,该当尽能够或许或许或许到场规模加倍遍及的室间品德节制评定勾当。疾病防备节制中间微生物尝试室的室间品德节制评估,还应增添对各到场查核的尝试室遏制惯例性的查抄,如品德节制的各种轨制拟定环境、履行环境,和未知标本的盲点品德节制等外容,以使室间品德评估使命加倍迷信和标准。
参考文献
陪同社会经济的疾速成长,古代医疗手艺获得较着前进,院内沾染监测成为医学成长的首要内容。在院内带领的高度关怀和正视下,院内沾染监控使命从构造落实到拟定严酷办理轨制,接纳的方式具备多样化,在临床中睁开须要的监测,从而使院内沾染监测使命慢慢走向迷信化、轨制化、标准化。病院是病患最集合的场合,各种百般的病患天天都堆积到病院期待医治,是以,院内环境极易遭到病原微生物的沾染,我院为此成立沾染监测科和微生物检测尝试室,以便顺应天下各级病院对院内沾染防控与监测使命的须要。文章对在院内沾染监测中微生物尝试室设立的首要性遏制阐发、切磋,报道以下。
1根据有关划定共同院内沾染监测科做好沾染防备与监控使命
微生物尝试室在临床查验中最首要的使命便是对激发院内沾染的病原菌范例遏制肯定。根据《消毒办理条例》、《病院沾染办理体例》和别的防备院内沾染的实行战略,成立抗菌药物公道利用条例,细菌检测轨制等。对各科室沾染条例履行环境遏制监视,和被监测科中的医护职员按期遏制会商、交换,根据监测详细数据向各监测科提出迷信定见。微生物查验尝试室委派专业职员共同院内沾染检测使命,同时按期到场国度级院内沾染培训,和院内沾染科一路监视相干条目,并将统统划定落到实处。
2监测体例与内容
2.1监测体例 在院内各病房及有关科室中都装备一位专业沾染监测节制职员,每一个月按期遏制一次查抄。同时在微生物查验尝试室中睁开细菌监测使命,对院内消毒不及格的内容完整追查,找到消毒不及格缘由和存在的题目,不只能防止近似事务再次呈现,同时还能为院内沾染监控供给靠得住数据。借使倘使消毒分歧请求,应当即从头消毒,统统及格后才能持续利用,防止院内产生穿插沾染。前进重点科室环境与平常常利用品的沾染监测使命,包罗:胃镜科、口腔科、供给室、产房、查验科、外科等,以便沾染源的尽早发明。根据微生物查验尝试室的监测功效,按期向院内沾染科总结、报告请示,经由历程阐发沾染病原菌,肯定下一步使命重点,为此后使命拟定公道打算。
2.2监测内容 微生物查验尝试室的监测内容首要有以下几点:①环境监测,包罗:医护职员的手、氛围、高压灭菌装配、物品外表、医疗东西等物品的细菌量,防止医疗物品、医疗东西和医护职员的手被病原菌污染后,沾染给病患;②前进一次性医疗用品的监测办理力度,对其品德严酷把控;增强重点科室致病菌的监测,包罗:金色葡萄球菌、梵衲菌属、化脓菌等;③一旦发明细菌很是或是产生风行趋向,应向有关科室实时传递,并向院内沾染监测科报告请示,接纳响应方式,阻断病原菌传布路子,做好防备节制使命,掩护易沾染人群,尽力为病患成立杰出医疗环境,同时晋升医护品德;④削减院内沾染病发率,利用有用方式掩护病患、医护职员和社会公家的安康。
3前进病原菌耐药性的监测
在微生物查验尝试室中判定分手病原菌匹敌沾染医治与细菌耐药性监测具备首要意思,以是,要将品德保障轨制完美,应前进与临床医治之间的共同。在利用美国临床检测尝试(NCCLS)标准对药物敏感尝试遏制标准,药物敏感尝试中利用的抗生素必然要适用、迷信、经济、公道,前进微生物查验尝试室在院内沾染监测使命中的本能机能,切确评估并解读尝试功效,实时发布院内病原菌的耐药性,为抗生素的临床利用供给迷信根据。
4将细菌耐药性的检测功效按期在院内发布,同时对细菌耐药性实行收集办理
谙练把握美国临床检测尝试(NCCLS)标准,这是判定抗菌药物敏感尝试功效靠得住性与切确性的首要内容。现阶段,拔取医治沾染性疾病的抗菌药物在大大都环境下,大夫是根据经历挑选的,可是经历选药也须要风行病资料和循征医学的撑持,将细菌耐药性的监测功效按期在院内公然,统计并阐发重症监护病房等首要科室中罕见病原菌的耐药与散布环境,对经历拔取抗生素、晋升重症沾染性疾病救治胜利率赞助很大。分地区并永劫候成立耐药监测网,颠末研讨阐发,很轻易得出本地区耐药病菌成长趋向和抗生药物的耐药性,有助于拟定本地区抗生素药物的利用,同时对经历用药具备很是首要的意思。
5论断
今朝,我国临床医治中微生物查验尝试室的成立和国际前进前辈程度比拟仍然存在很大差别,和我国院内病原菌和沾染性疾病的耐药性存在严峻不相顺应的近况;并且,临床医治有关局部和查验科有关职员对微生物查验尝试室的平常运作、软件与硬件扶植贫乏正视度。在各种倒霉条件下,微生物查验尝试室应主动赞助临床做好院内沾染性疾病的医治与诊断使命,并将其看成最首要方针履行。如许微生物查验尝试室才能更好的成长,为院内沾染性疾病的监测、防备、医治、节制做出更多进献。
参考文献:
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【关头词】:食物微生物检测品德节制
跟着人们糊口程度的不时前进,食物宁静题目慢慢激发列国当局、公家的正视。出格最近几年来,跟着瘦肉精、三聚氰胺、毒胶囊、皮革奶等食物宁静事务不时暴光1,食物宁静题目更成为社会各层面存眷的核心。食物宁静题目中,微生物污染构成的食源性疾病仍是天下食物宁静中最凸起的题目2。微生物方针不只可用于对终产物的卫生监视办理,并且也是食物出产、运输和发卖等全历程卫生品德节制的监测手腕3。为了前进食物的卫生品德,保障花费者饮食宁静,食物微生物查验的体例由传统的形状规划、血清试管凝集尝试等慢慢成长到最近几年来的份子程度查验,并向仪器化、主动化、标准化标的目标成长4。但因为影响食物微生物检测功效的身分庞杂多样,以是对食物微生物查验的各个关头加以公道有用的品德节制,是前进食物微生物查验功效,保障食物宁静的有用方式。
一、 样品收罗与措置
1、 采样
食物微生物查验中,样品的收罗必须具备代表性。ICMSF拟定的食物微生物学阐发采样体例5,今朝已在国际外被慢慢推行接纳。应严酷遵照统计学体例,根据详细环境拟定响应的抽样打算。通俗应接纳完整未开封的样品,如是散装样品,采样必须在无菌操纵下遏制。采样的用具,应事后经灭菌措置。样品的数目应知足查验、复验、备查的须要。每一个样品要申明其详细信息。
2、 送样
有品德保障的样品是获得切确查验功效的底子。样品应尽快送到食物微生物查验室(
3、 收样和措置
样品投递尝试室后,先判定样品是不是已蜕变和是不是知足查验标准。瓶装检样措置时可用扑灭的乙醇棉球炙烤瓶口灭菌,用石碳酸纱布盖好,再用灭菌开瓶器将盖启开。袋装样品利用75%乙醇棉球消毒袋口后遏制查验。固态样品用均质器以无菌操纵体例措置样品,调理均质器均质时候措置差别品种的样品。微生物培育时要切确记录温度、气体浓度等参数,使其严酷适合查验法式请求6。原始记录应实时记录,原始记录格局请求有充沛的信息量,并具备可朔源性。
二、 尝试职员本质与才能
尝试职员的本质与才能影响到终究的查验功效。食物微生物学查验职员应:有正当的上岗天资;具备多方面的专业手艺常识7;把握微生物学的有关底子常识;把握并切确懂得国度食物卫生微生物查验体例、食物的国度标准、行业标准及本企业的企业标准,熟习标准化法的相干常识;熟习计量学的根基常识、计量法则和律例及品德保障体系常识;熟习食物的出产工艺;实时主动更新自身的常识。
三、 食物微生物查验历程
1、 查验体例
食物微生物查验必须根据现行有用的国度标准、行业标准及卫生行政局部颁发的查验体例遏制8。对查验标准的变更,通俗都有商定成俗的经历性划定。可是若何节制现实使命中“矫捷性”不至于变成“不法性”,须要查验职员自立辨认。
2、 查验环境
微生物查验室是遏制食物微生物学查验的处所,应零丁设置,操纵区与办公区应分隔,防止室间污染和尝试室沾染产生。无菌室要设有套间或缓冲间,最好设有推拉门,以防止氛围振动荡。颠末培育后的培育物,经无害化措置前方可排放、洗刷。对染菌物品及废料,应颠末消毒灭菌后才可洗濯或烧毁,防止污染环境8。
3、 仪器和装备
微生物查验室应装备充沛的查验使命须要的仪器、装备和东西。仪器装备计量用具利用前应经计量判定局部判定及格前方可利用;仪器装备量具的量程、切确度等,要适合检测名方针响应请求;严酷按操纵规程请求利用,并做好运转查抄及仪器掩护。
4、 培育基和试剂
采办培育基和试剂时请求供给商提品德控证书。培育基和试剂利用前起首经由历程外表、批号、PH值、灭菌请求、挑选性等遏制开端评估,还要用阳性对比菌株做质控。根据培育基和试剂标签申明的蕴藏条件保管。差别批号的培育基和试剂不要夹杂利用。受潮蜕变的干粉培育基果断不能利用。自配的培育基要严酷根据配制标准遏制配制和保管,保管培育基配制记录。
5、 确证尝试
做平行样,保障功效的可比性;设立空缺对比,防止别的污染而致使的功效不切确;设想恰当的质控频次,遏制质控尝试。将质控菌株与惯例使命一路遏制,不能为质控菌株设想零丁操纵法式,更不能专人专做。当质控标准菌株的内涵敏理性产生转变时要改换新的菌种。
6、 查验报告
检测报告应切确、清楚、明白、客观地反映查验功效,能够或许或许应用统计学常识对偏差遏制措置,并参照必然的标准对食物微生物的数目和品德遏制体系性的评估。查验报告需经有资历的查核职员查对具名,并加盖印章后失效。
四、 到场盲样查核
主动到场下级营业局部下发的盲样查核,即遏制尝试室间比对和中间品德办理办公室构造的职员比对考证尝试。
总之,跟着社会的成长和科技前进,食物微生物查验手艺正向高效力、高标准、高精度和高活络度的标的目标成长,出格是最近几年来鼓起的基因芯片手艺及主动微生物检测体系。与此同时,加倍严酷的品德节制体例必须陪同检测手艺的成长而成长,从而得出尽能够或许或许或许切确的检测功效,更好的为人类大众卫生、食物宁静、养分安康与疾病防备等做出进献。
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在天下规模内遍及存在的构成病院沾染的身分首要包罗:第一,病院抗生素的分歧理利用,抗生素的利用剂量、体例、时候等都达不到标准请求,耐久如许下去,药量贫乏,血药浓度太低,固然能够或许或许按捺体内病原菌的成长,但对本来就存在于身材内的病原菌底子就不能完整的将其断根。跟着时候的推移,体内的病原菌就会在人体内成长滋生。第二,慢性耗损性疾病和癌症病人,因为自身免疫力低下,人体的某些部位的通俗菌群就有能够或许或许或许致使病人自身沾染。第三,在病院内良多仪器和内窥镜的利用,消毒不严酷也有能够或许或许或许致使病院沾染,增添病院沾染的机遇。第四,血液透析时透析液不及格,消毒液的浓度节制不及格等这些环境城市致使病院沾染。为此微生物尝试室在病院沾染节制中的首要性首要体此刻:
一、切确判定病院沾染中所触及的微生物
微生物尝试室对病院沾染节制起到了不可轻忽的感化。此中最首要的一个感化:切确判定病院沾染中所触及的微生物。激病发院沾染的微生物有以下几个特色:条件致病菌;耐药性;某些微生物能够或许或许或许在体外成长滋生。为了能够或许或许或许很好的节制病院沾染,就须要微生物尝试室能够或许或许或许不时把握更多的微生物现实常识和手艺判定程度,切确的分手和判定在病院沾染中所触及的微生物,争夺在分手历程中做到标准化,力图做到判定分型切确。微生物尝试室在节制病院沾染中要按时收罗病院环境标本,如病房氛围、医疗东西、消毒液、使命台面、手术室氛围、措置室氛围等,在收罗病人标本时要尽能够或许在抗生素利用前,收罗后当即送检,差别标本的措置适当,如许才能前进阳性检出率,对病院沾染起到了很好的节制感化。
二、增进宁静、协调病院的构成
构建宁静协调病院从底子上来讲是在新情势下保障病院获得更不变成长的首要条件。在对构建协调病院的鞭策感化中,必须增强微生物尝试室构造的扶植力度,才能增强病院的协调程度。因为协调病院的构建离不开微生物尝试室的赞助和鞭策,只需微生物尝试室中的使命职员不时的前进自身的专业程度,在使命中做好标本收罗、细菌判定、病原菌质控等各项使命,才能从底子上节制病院沾染。别的一方面,病院的病原微生物尝试室同时也对医护职员的杰出医德的构成起到了必然程度上的教导感化。请求医护职员看待病人要持极度担任的态度和不时改良的精力。在使命中要自发遵照病院的各项有关划定和轨制,要增强无菌看法,在使命中规矩自身的使命风格,对峙切确的态度。只需构建宁静、协调的病院轨制,才能在剧烈的市场合作中求得保管和不变的成长,使病院在社会上具备杰出的名望和名誉,也才能从更大程度上鞭策病院的不时成长。
三、按期的反应尝试室资料,增强对病院沾染节制的办理
病院微生物尝试室除能够或许或许或许切确的判定病原菌,增进宁静、协调病院的构成,还按期的反应微生物尝试室资料,在必然程度上增强了病院的沾染节制办理。临床微生物尝试室该当将尝试室在标本收罗和病原菌分手、培育和判定的历程中所获得的相干资料、信息等实时的送到病院沾染节制科,并增强与临床科室间的接洽,经由历程这类信息之间的监测,改良医务职员的无菌观。并对病院沾染节制的各种风险身分接纳实时有用的方式,防备病院沾染的产生。别的一方面,病院的临床微生物尝试室在病院节制沾染办理使命中,起到了必然的增强办理的感化。因为在使命中不能否定的是有的微生物尝试室职员,不放在眼里病院各项规章轨制,干事不担任;办理和查抄使命展开的不完整,未能实时的发明潜伏的宁静隐患并实时将其覆灭在抽芽中。加上各种方面的缘由,一向是病院节制沾染办理使命的一大妨碍。是以,病院的微生物尝试室对标准本能机能,增强病院沾染节制各局部的严酷别离,促使医护职员在自身的责任和权力规模内做好本职使命和利用权柄方面起到必然的节制感化。对病院各种沾染的风险身分增强办理,促使全院医护职员都到场到病院沾染节制的使命中来,按期召开病院各科室主任、护士长集会,对病院每一个阶段的沾染节制使命的展开环境遏制传递,使临床科室在病院沾染节制使命中都能做到对症下药。
综上所述,病院的临床微生物尝试室在病院中不只能够或许或许或许分手、培育和判定院内的病原菌,同时还对增进宁静、协调病院的构成,按期的反应尝试室资料,增强对病院沾染节制的办理等使命起到了必然的鞭策感化。病院沾染节制是一项耐久、按部就班、不容轻忽的使命,微生物尝试室职员必须不时前进自身的手艺程度和现实本质,鞭策病院的沾染节制使命走向。
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中图分类号:G48 文献标识码:A
Suggestions of Food Microbiology Laboratory Practice Management
FAN Jinshan, LI Jing, CAO Qingguo
(Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry, Jurong, Jiangsu 212400)
Abstract Food microbiological testing of hygiene and safety in the protection of food particularly had a prominent role, so food microbiology laboratory management must also be standardized. From the aspects of management requirements and quality control of food microbiology laboratory, this paper elaborated several standardized management recommendations for the future of scientific management.
Key words food; food microbiology; management
在飞速成长的二十一世纪,跟着人们糊口程度的前进,人们对食物已不再是仅仅知足于饱腹,而是愈来愈多的夸大食物的养分与卫生,是以,食物卫生宁静遭到了愈来愈多的存眷,此中食物微生物检测便是食物宁静中一项必不可少的手艺名目,是保障食物宁静卫生的首要手腕,此中食物微生物检测方针首要包罗菌落总数、大肠杆菌、致病菌、霉菌和酵母菌这五项。最近几年来,我国卫生部每年接到食物中毒事务的报告在两百起摆布,此中大局部是因为致病菌激发的,是以食物微生物的风险是食物品德宁静的首要题目。别的,因为微生物所具备的生物学特色,食物很轻易遭到微生物的污染,在良多食物加工关头中都很难节制,是以食物微生物尝试室的标准化办理尤其首要。本文就食物微生物尝试室的标准化办理谈谈以下几个方面的倡议。
1 食物微生物尝试室的办理请求
1.1 食物微生物使命职员的请求
使命职员应具备必然天资的微生物学常识或附近专业的常识,能胜任使命所必需的装备操纵和微生物检测手艺(如无菌操纵、菌落手艺等),按期遏制尝试室生物宁静等方面的培训,遏制相干持续教导打算(如收集视频培训)。
在操纵之前,使命职员必须严酷遏制自身微生物的干净,防止污染无菌室,这就请求使命职员必须穿无菌使命服,戴帽子、口罩,同时做好手部消毒,制止抽烟。在操纵历程中,正视不要职员过量,对峙必然的存眷度,如许才能保障尝试的切确度和切确度。
1.2 食物微生物尝试室的卫生请求
尝试室按期打扫轨制,根据内容合作、地区包干的情势遏制卫生大打扫,天天一小扫、一周一大扫,并按期做卫生大查抄。有专人遏制带有致病微生物的消毒灭菌使命,对尝试中烧毁的培育基和用具要遏制严酷高压蒸汽灭菌锅,做好洗濯使命,同时做好响应的记录,最初做好响应使命总结,相干带领做好按期查验,验收各项办理历程和履行环境。
食物微生物尝试室应成立微生物尝试室的灭蝇、除甲由和其余益虫的防治打算,室内装配灭蝇灯和紫外灯等,防止因无害虫豸而激发尝试室内细菌、病毒向外传布的能够或许或许或许性。①
1.3 食物微生物尝试室的仪器办理请求
食物微生物尝试室的装备应配有温控举措方式(如培育箱、冰箱等)、丈量用具(如电子天平、菌落计数器等)、定容装备(如移液管、微量移液器等)、灭菌举措方式(如高压蒸汽灭菌锅、超净使命台等)、其余装备(如显微镜、离心计心情等)。装备的操纵利用体例应明白挂墙,便于进修利用。装备应按期查验其运转参数,应到达划定的机能参数,并适合相干查抄方针。装备一旦呈现毛病不能通俗利用,应当即遏制利用,并当即接洽厂家维修。
统统装备都应做好装备信息挂号(如装备称号、采办时候、型号、建造厂商等)、利用环境挂号表,如许能实时监测装备的运转环境,做好装备掩护使命。对一些仪器装备在操纵上有一些出格正视的处所,能够或许或许申明响应的正视事变,便于操纵和仪器的掩护,如超净使命台中间温馨提醒“操纵时请封闭紫外灯!”在显微镜上贴有“利用完油镜正视干净我哦!”别的装备在操纵历程中应有受过培训的使命职员在场作响应指点,以防呈现毛病和不测。对一些出格的装备要做好按期查抄,比方高压蒸汽灭菌锅必须按期遏制宁静测试,超净使命台必须按期遏制紫外线强度测试。
1.4 食物微生物尝试室办理职员的请求
办理职员作为食物微生物尝试室办理者,除该当具备使命职员应有的本质外,还应有必然的办理才能,包罗尝试室的平常利用办理、尝试室装备利用指点和按期掩护、兼顾食物微生物的检测使命支配、对突发事务的措置才能等。
别的,办理职员应按期做好使命职员的相干培训,同时做好手艺更新,前进那些有关食物微生物检测的媒介手艺的存眷度。办理职员和使命职员只需按期做好自身常识储蓄使命,前进才能、经历等综合本质,做好持续受教导打算,成立杰出的“手艺撑持体系”,如许才能迷信、标准地做好食物微生物的办理使命,完美尝试室的使命。
2 食物微生物尝试室的品德节制
一套迷信、严酷的品德办理体系是决议实食物微生物验室检测功效是不是切确和切确的首要身分。除有罕见的“尝试室宁静轨制”、“先生行动标准守则”,还必须有明白的“使命职员操纵守则”、“办理职员办理守则”等。完成品德办理的方针方针,有用地展开各项品德办理勾当,必须成立响应的办理体系。
第一,微生物检测室必需零丁设立,防止污染,同时要按使命流程配有筹办室、消毒室、缓冲室、无菌室、培育室、检测室等;第二,统统触及到食物微生物检测的装备必须严酷CIP体系遏制完整,用具也要用新洁尔灭等化学消毒液遏制消毒;第三,无菌室作为检测使命的关头关头,必需做好卫生使命,保障无卫生死角、干净死板、透风杰出,装配紫外灯及氛围过滤装备等;第四,遏制微生物检测的使命职员必需经由历程响应的专业手艺培训获得正当的上岗天资外,同时严酷根据GB/T4789-2003遏制微生物的检测使命,熟习标准化法的相干常识;第五,在尝试中所利用的试剂、培育基必需严酷根据微生物检测操纵规程遏制设置装备摆设,有益于食物微生物检测的标准化;②第六,做好菌种收藏使命,保管职员请求做到仔细、严酷、迷信的保管,每种菌种要零丁保管以防穿插污染,特定的菌种要特定保管,同时做好响应的利用记录、保管信息记录,按期遏制菌种挑选、颐养。
3 总结
跟着中国在入WTO此后,国际食物商业交换更加频仍,对食物卫生宁静的请求越来严酷,进、出口食物的卫生除请求出口食物适合我国相干标准和划定,接管国度相干收支口商品查验局部监视和查验外,还必须适合入口国度对入口食物的标准,此中对食物微生物的检测也愈来愈刻薄,是以,若何遏制食物微生物尝试室的标准化办理是一件尤其首要的课题。今朝,国度也出台了相干条例,在必然程度上转变了今朝微生物尝试室办理方面的题目,尝试室的将来正朝着标准化、法制化、适用性和宁静性轨道成长前行。在古代社会,食物宁静题目遭到遍及存眷,而微生物检测的首要性尤其凸起,以是对其迷信办理的程度是将来食物微生物尝试室办理职员的重中之重。
咱们对常常利用的仪器装备拟定相干的功课指点书和检定校准打算,出格正视对新购仪器和那些轻易漂移仪器的检定。拟定仪器/装备清单,指定专人保管,每台仪器装备上均须贴有较着标识,此中资产标识包罗编号、称号、型号、出产厂家;状况标识:仪器装备别离以送检、送校、自检、自校表现其所检定的状况。校验及格则贴有绿色及格证(计量编号、校验日期和下次校验日期),凡校验不及格、过时、需报修的装备仪器应贴有白色停用证。为了保障切确利用各种仪器,做好利用和维修、颐养记录。维修后的装备/仪器从头检定并校准证实其功效方针已规复,做好完整的查抄记录,方可利用。
为了做好常常利用仪器装备的品德节制使命,咱们把尝试室内利用频次高且须要监控的仪器装备开端分为三类:(一)培育箱(通俗培育箱或CO2培育箱等)、死板箱、高压灭菌锅、污染使命台、pH计、 冰箱,(高温冰箱或冷柜)温度计、紫外灯、显微镜、离心计心情、天平);(二)小计量容器;(三)微生物测定仪器、微生物判定仪器、氛围采样器、酶标仪等。
1 温度计 尝试室必须要有使命温度计和参照温度计,别离做好标识。使命温度计用于平常温度查抄;参照温度计用于校订使命温度计。按期查抄温度计的运转环境,通俗半年一次。对温度计平常查抄、校准查抄和运转查抄,都应做好响应的手艺记录。
2 培育箱 根据培育物性子及温度请求,培育箱应别离设置(以用处和温度分)。培育箱的温差请求,通俗显现值与实测值相差不大于±1℃,箱体内各点温差(外部的温度平衡性)和温度动摇一样不大于±1℃。温度监控体例:可将使命温度计置甘油中,放入待测箱体内,察看使命温度计的温度,最好天天监控1-2次,并做好记录。
3 高压灭菌锅 尝试室常常利用生物唆使菌法、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等体例对其灭菌功效遏制监测。高压灭菌锅要由专人按功课指点书操纵,并做好每次的利用记录。平常使命记录应包罗以下信息:高压灭菌的资料、起头时候、压力/温度、掏出时候、高压灭菌胶带的色彩变更。在利用高压灭菌锅时,锅内支配物品不宜过量,并且单元体积内的内容物(每瓶内的培育基)不能太多。同时应正视内容物差别耐受温度。高压后物品总的裸露时候最好不要跨越45min。高压灭菌锅校准周期通俗在半年。
4 死板灭菌箱 平常使命记录中应包罗以下信息:起头的时候、到达灭菌温度时的时候、掏出的时候(或封闭时候)。死板灭菌箱的温度校准;用参考温度计遏制温度测试,温度请求与切确度:160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者为灭菌2h,后者为30min。死板灭菌箱校准时候通俗为一年。
5 天平 请求支配在无振动、无气流影响的程度台面上,每次利用做好查抄记录。天平作为计量仪器是到场国度强迫检定规模的,通俗1次/年遏制检定。运转查抄频次按运转打算或按产物(天平出产厂家)给出的标准分量单元遏制对比。
6 pH计 利用前利用标准液遏制校准。缓冲液利用有用期:PH4.00 有用期约1年; PH7.00 有用期约6个月;pH9.00 有用期约6个月。pH计要按期掩护,电极外表要按期洗濯,同时对电极敏理性遏制检测及极性规复。
7 超净使命台 请求干净度为100级,氛围沉降30min,细菌数<1个/皿。垂直流污染使命台,细菌数<0.49个/皿.。污染使命台运转查抄频次应每一个月一次,首要是细菌沉降检测。污染使命台高效过滤膜通俗为一年改换一次,并同时遏制粒子与细菌沉降检测。
8 紫外灯 检测体例包罗仪器测试法和生物测试法。前者是经由历程公用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国度消毒手艺标准中划定在间隔照耀1米处,请求强度为90。生物测试法便是接纳必然的细菌培育物,经必然比例浓缩,菌量节制在200-250个/0.5ml,涂布平板在紫外灯光下照耀2min,同时设置通俗光源的对比组,后置37℃培育48h,计较其杀灭率。请求杀灭率达99%。
9 酶标读数仪、洗板机 天天:查对滤光片波长,查抄洗板机管道是不是畅达,是不是有漏液景象;每周:干净仪器外表,掩护光学整机不沾尘埃;每一个月:查抄洗濯时各孔是不是与响应的冲刷头对位杰出,负压是不是适合划定请求;每年:查抄、洗濯滤光片,若是呈现分裂或霉点则要改换。根据仪器内具备的校准法式或利用校准板,对滤光片的紧密度遏制校准并保留记录。尝试历程中发明很是环境,应随时遏制措置,可根据利用环境改换须要的部件。酶标仪使命中常常利用阳性对比检测其功效的通俗性。
10 移液器 按期(每年最少1次)校准,发明很是环境应随时遏制校准。 标定体例包罗有色溶液光谱阐发法、称量校准法、同位素计数法和利用配套校准盒等。 校准多道移液器时,必须保障每一个加样头都能够或许或许或许持续、切确地加样。移液器的紧密度应在厂家申明书划定的规模内。
11 冰箱和孵育箱 天天查抄和记录冰箱温度,每一个使命日查抄记录孵育箱温度,并做好记录,利用颠末计量局部校准及格的温度计丈量冰箱和孵育箱的现实温度;根据差别规格冰箱和冻存样品性子对温度请求差别,调理响应的温度。支配请求4℃保管的试剂盒的冰箱温度应在2~8℃;用于培育的孵育箱温度偏差应小于1℃;用于冷冻核酸和抗原检测的血浆、淋巴细胞和病毒上清适合在-70℃冰箱,请求冰箱温度低于-65℃。
以上十一种仪器是咱们平常使命中利用频次较高的,对这些仪器装备的利用和办理咱们堆集了一些经历,平常使命中做好仪器的运转环境和利用记录,以便实时发明题目。如许就更能保障检测历程的顺遂遏制,终究保障咱们的检测功效更迷信更切确。
参考文献
[1] 中国尝试室国度承认委员会.尝试室承认与办理底子底子常识[M].北京:中国计量出书社,2003
[2] 国度认证承认监视办理委员会.尝试室天资认定使命指南[M].北京:中国计量出书社,2007
中图分类号:G642 文献标识码:A 文章编号:1673-9795(2013)05(a)-0119-01
微生物学自身的特征决议了它很强的尝试性,而微生物尝试也就瓜熟蒂落的成为微生物学不可或缺的首要构成局部。微生物学尝试作为生物的底子尝试课,其尝试的现实和体例对古代生物迷信的每一个范畴都有着首要的影响。出格是对古代性命迷信、食物迷信和环境迷信等都有极为首要的影响。是以,要想先生对性命迷信底子常识和性命迷信的成长静态有个体系的懂得,就必须做好微生物学的研讨讲授使命。微生物学的讲授关头仍是尝试研讨,可是一个尝试室的装备前进前辈与否,更是作为评定高校科研程度的首要表现。作为高档本科院校,高效的尝试室办理和公道的尝试讲授鼎新对先生立异才能的成长尤其首要。笔者就多年的讲授经历和近年我校对微生物学尝试讲授的鼎新,和对尝试室的办理做出以下总结。
1 增强尝试室办理力度,晋升讲授品德
咱们都晓得公道的办理章程可为晋升讲授功效,培育和晋升先生自立脱手及立异才能奠基杰出的底子。可是尝试室的统统法式是一个完整体系,必须从细节做起,才能到达办事于讲授、有益于先生进修方针。
1.1 强化尝试室办理,更新健全各项办理轨制
杂乱无章的尝试室办理轨制,才能缔造宁静有序的尝试环境,从而是尝试通俗遏制。详细实行以下:支配特定职员办理尝试室,且拟定除院办公室有备用钥匙外,和尝试办理职员配带1把,其余人一概不得照顾,从而确保了尝试室的装备宁静。水患、火警的防控是尝试室办理的根基。高校微生物尝试室也建有“尝试室宁静轨制”和“尝试职员职责”等轨制。便利的惯例办理岂但缩减了使命量,并且还下降了使命难度,使效力在慢慢晋升中。咱们请求先生利用试剂后实时放回原处,便于本组同窗或下组同窗利用。防止了先生利用后到处乱放、不能实时清算的坏习气,使得每次尝试都能够或许或许或许井井有理的遏制。如许岂但确保尝试能毫无过失地展开,并且加大了尝试室办理的宁静性。
1.2 增强仪器办理,确保尝试通俗遏制
显微镜无疑是最常常利用的尝试仪器,若是办理不妥会大大影响尝试的历程。是以,在利用前要向先生屡次夸大务须要宁静利用,其余仪器的利用也会一样夸大,功效很是较着。为了便于检验,咱们将统统的尝试仪器都遏制了编号,并将各仪器配有益用挂号本,请求利用者在利用后实时挂号利用环境。而后将其挂在有响应编号的显微镜上,并将显微镜放入响应编号的蕴藏柜中,如许全部尝试室显得出格整齐有序。学期竣事前,咱们对统统的显微镜实行完整检查,将须要补缀的遏制统计,而后将功效提交到秘书办公室,使其能够或许或许或许立即获得补缀,确保放学期尝试时显微镜能够或许或许或许通俗利用。
2 强化尝试讲授鼎新,顺应情势成长须要
2.1 成立完美的查核轨制
以往的生物讲授尝试检测过于垂青尝试报告上的最初功效,却忽视了在全部历程中培育先生们的实地脱手才能。这类尝试致使先生们感觉只需在最初填写的论断是对的便能够或许或许,底子不用现实操纵,这类尝试不只落空的自身的意思,还大大地抹杀了先生到场尝试的乐趣。咱们该若何应答这类环境?为此咱们对尝试核轨制做了点窜,将查核内容变动为从熟记尝试报告―― 详细操纵―― 实在做出尝试报告。经由历程这次尝试轨制的完美信任大幅度前进了先生的尝试主动性。
2.2 增强讲堂全体联贯性
生物尝试课是在每学年的第一学期开课,为了使每一个尝试到达预期功效。在底子手艺培训中,咱们将尝试步骤按挨次分为:底子尝试、微生物的形状察看尝试、微生物数方针判定、细胞巨细判定和微生物心理生化方针的测定。培育基的制备及高压灭菌尝试,该尝试中制备的大批培育基能够或许或许供后续尝试利用。经由历程全部历程,器皿和仪器的利用体例将深切先生大脑,和是先生对尝试根基现实获得进一步的体会,可在道理上更进一步懂得每步骤的寄义,在操纵上不时体会每一个细节的正视事变,如许谙练全部操纵历程,养成较好的尝试操纵习惯,为此后的深切研讨垫下健壮的底子。
2.3 让先生自立实行尝试
为了熬炼先生尝试的根基功,强化先生尝试脱手才能,须要对《微生物学》课程尝试遏制优化。考证性尝试,先生只能学到良多底层的操纵手艺,却没法将所学内容与实际相接洽起来。让先生贯通讲堂上所学的尝试手艺,去进一步拟定出新的打算,将差别的尝试手艺做到综合应用。这不光让先生把握了尝试理念,更稳固了尝试手艺,并且还晋升了先生的主动自立操纵手艺。
传统理念中,尝试后期筹办都是由教员们遏制,先生完整是主动进修常识,尝试课时他们只须要根据尝试步骤做下去便可。为了转变这一场合排场,先生都是自身脱手筹办尝试,自身脱手的先生岂但稳固了尝试课所学内容,他们的自立脱手才能也获得了大大的前进,较着高于其余同窗,保障了整节课的顺遂遏制。先生到场筹办岂但加重了尝试教员的筹办使命量,还使先生切身材验了筹办尝试的啰嗦和辛劳,为他们此后做别的方面的尝试和毕业设想奠基了踏实的地基。
3 结语
总之,一节尝试课胜利的遏制和杰出的尝试室办理是密不可分的。近几年,经由历程咱们对峙不懈地强化尝试室的办理与使命体例的鼎新,见效很是较着。先生岂但对微生物学这门看似死板有趣的学科有了稠密的进修乐趣,并且进一步变更了教员们对微生物学现实讲授和尝试讲授的主动性。只需不时强化自身,敢于立异,对峙将尝试理念和实际相连系的准绳,消弭先生的涣散氛围,尝试讲授的品德肯定还慢慢获得进级,讲授鼎新也将推向纵深。
参考文献